Hogyan kell immunfluoreszcenciát csinálni?

Tartalomjegyzék:

Hogyan kell immunfluoreszcenciát csinálni?
Hogyan kell immunfluoreszcenciát csinálni?

Videó: Hogyan kell immunfluoreszcenciát csinálni?

Videó: Hogyan kell immunfluoreszcenciát csinálni?
Videó: Оригами Когти. Как сделать бумажные когти Бумажные поделки 2024, November
Anonim

A következőkben áttekintést adunk a közvetett immunfluoreszcens festési protokoll különböző lépéseiről

  1. Kísérlettervezés és minta-előkészítés. …
  2. Minta rögzítés. …
  3. Sejtpermeabilizáció. …
  4. Blokkolás. …
  5. Primer antitest inkubáció. …
  6. Másodlagos antitest inkubáció. …
  7. Ellenfestés és szerelés.

Hogyan végeznek immunfluoreszcenciát?

Minden inkubációs lépés szobahőmérsékleten megy végbe

  1. Mossa meg kétszer a cellákat, és csipesszel óvatosan helyezze be a fedőlemezt felfelé fordított cellákkal a párásított kamrába.
  2. Rögzítse 4%-os formaldehiddel 10 percig, majd mossa le 3 ×.
  3. Permeabilizálja 0,1%-os TX-100/PBS-sel 15–20 percig, majd mossa le 3 ×.

Hogyan alkalmazzuk az immunfluoreszcenciát egy sejtben?

Immunfluoreszcencia protokoll a tapadó sejtekhez

  1. Beoltás 1–1,5 x104 sejt egy 4-kamrás tárgylemez üregében 500 ml táptalajban. Inkubáljuk 37°C-on 5% CO2.
  2. 32–36 órával a sejtoltás után távolítsa el a sejttenyésztő táptalajt, és öblítse le a sejteket háromszor 500 µL 1X PBS-sel.

Mi egy példa az immunfluoreszcenciára?

Például egy kutató létrehozhat primer antitesteket egy kecskében, amelyek több antigént is felismernek, majd festékkel kapcsolt nyúl másodlagos antitesteket alkalmazhatnak, amelyek felismerik a kecske antitest konstans régióját (" nyúl anti-kecske" antitestek).

Mire jó az immunfluoreszcens festés?

Az immunfluoreszcens (IF) festés egy széles körben használt technika a biológiai kutatásban és a klinikai diagnosztikában Az IF fluoreszcensen jelölt antitesteket használ specifikus célantigének kimutatására. Ezt követi a képalkotás, ez egy nagyon közvetlen technika, mivel valóban láthat valamit.

Ajánlott: