A nem specifikus antitestkötés és ennek következtében a háttérjel csökkentése érdekében javasolt blokkoló oldatot használni az antitestekkel való inkubáció előtt A leghatékonyabb blokkoló megoldás legyen olyan, amely ugyanabból a fajból származó szérumot tartalmaz, amelyben a másodlagos antitestet termelték.
Hogyan lehet megelőzni a háttérfoltokat?
A szövetmetszetek vastagságának csökkentése segíthet csökkenteni a háttér elszíneződését. Vágjon vékonyabb részeket a tisztább IHC érdekében. Arra is fontos ügyelni, hogy a részek ne száradjanak ki, mivel a szárítás erős, nem specifikus festődést eredményezhet.
Hogyan optimalizálja az immunfluoreszcenciát?
Immunfluoreszcens mikroszkópia: 10 technikai tipp a sikerhez
- Sejtrögzítés és permeabilizálás. …
- Antitestspecifitás. …
- A megfelelő antitesthígítás használata. …
- Pufferek és blokkoló szerek optimalizálása. …
- Megfelelő sejtsűrűség használata. …
- Többszörös festés. …
- Másodlagos antitestek. …
- Háttér csökkentése.
Mi okozza a háttérfestést?
Háttérfestődést okozhat nem megfelelő antitestkötés vagy hibák a szövetlemez elkészítésekor.
Csökkentik a másodlagos antitestek a háttérjeleket?
F(ab) specifikus másodlagos antitestek segíthetnek csökkenteni a háttérjelet azáltal, hogy megszüntetik a szövetekben a másodlagos antitest által talált IgG fehérjék nem specifikus kötődését.
