A egyetlen alacsony g-erejű centrifugálás lépés enyhe sejtlízist tesz lehetővé, és megakadályozza a sejtmagok kiterjedt érintkezését a citoplazmatikus környezettel. Ez a gyors módszer nagy reprodukálhatóságot mutat a vizsgáló által igényelt viszonylag csekély sejtmanipuláció miatt.
Mit tesz a centrifugálás a sejtekkel?
A különböző sebességű centrifugálás lehetővé teszi a részecskék „frakciókra” történő szétválasztását, attól függően, hogy mennyire könnyen ülepednek (1. doboz). Például alacsony centrifugálási sebesség mellett a nagy sejtek elválaszthatók a kis celláktól.
A centrifugálás eltávolítja az elh alt sejteket?
Elh alt és élő sejtek szétválasztása centrifugálással
A sejttörmelék eltávolításának egyik legegyszerűbb módja a sűrűség-gradiens centrifugálás. A sűrűséggradiens centrifugálás egy centrifugának nevezett eszközt használ, amely heterogén keveréket forgat nagy sebességgel.
Hogyan lizáljuk a sejteket?
A technika során a sejtszuszpenziót száraz jég/etanol fürdőben vagy fagyasztóban lefagyasztják, majd az anyagot szobahőmérsékleten vagy 37°C-on felolvasztják. Ez a lízismódszer a sejtek megduzzadását és végső soron eltörését okozza, mivel a fagyasztási folyamat során jégkristályok képződnek, majd felengedés közben összehúzódnak.
Mi történik, ha túl gyorsan centrifugálja a sejteket?
A túl gyors pörgés sejtek "elkenődését" okozhatja a cső falán, ami hiányozhat a sejtek újraszuszpendálásakor.
